Stabilité de préparations hospitalières de suspension de bactériophages anti-staphylococciques

Contexte
Les bactériophages, virus naturels des bactéries, représentent une option thérapeutique potentielle pour les infections difficiles à traiter. Le développement de médicaments de phagothérapie (Phage Therapeutic Medicinal Products, PTMP) impose des études de stabilité à long terme conformes aux lignes directrices ICH, complétées par une modélisation de stabilité avancée (par Advanced Kinetic Modeling, AKM) permettant de prédire et de maîtriser précocement les risques d’instabilité de ces produits biologiques très variables. Cette étude visait à évaluer la stabilité de quatre PTMP anti-staphylococciques produits à l’hôpital (Silviaviruses V1SA19, V1SA20, V1SA22 ; Rosenblumvirus V4SA02) selon les méthodologies AKM et ICH, et à comparer leurs résultats.

Matériel et méthodes
Douze lots (N = 12) de PTMP purifiés ont été formulés dans la solution d’excipients multicomposants brevetée PhageProtect, filtrés (0,22 µm) puis répartis aseptiquement en flacons de verre de type I (1,2 mL). Les attributs qualité critiques (CQA), définis conformément au chapitre 5.31 de la Ph. Eur. relatif aux PTMP, comprenaient : le titre infectieux (≥ 10⁸ UFP/mL, spot test), l’agrégation particulaire (diamètre moyen : 140 ± 40 nm, interférométrie), la pureté (> 99,9 %, qPCR), l’osmolalité (400 ± 40 mOsm/kg), le pH (7,5 ± 0,5), la stérilité, les endotoxines (< 350 UI/mL), la contamination particulaire (< 6 000 particules/flacon ≥ 10 µm ; < 600 ≥ 25 µm) et la concentration en excipients (sodium, potassium, phosphate, polysorbate 80 ; critère d’acceptation ± 10 %). L’étude AKM du V1SA19 a été conduite à 5 °C, 25 °C, 30 °C et 40 °C pendant 3 mois, avec des analyses à J0, J7, J14, J28, J60 et J90 (N = 3). Le titre infectieux a été modélisé sur 1,5 an par AKM, tandis que l’étude ICH évaluait l’ensemble des CQA à 5 °C ± 3 °C et 25 °C ± 2 °C sur 2 ans (J0, M0,5, M1, M1,5, M2, M3, M6, M12, M18).

Résultats
Les titres phagiques prédits par AKM à 5 °C étaient de (8,8 ± 0,2)E8 UFP/mL contre (6,9 ± 3,0)E8 UFP/mL (ICH) à 12 mois, et de (8,2 ± 0,3)E8 contre (5,5 ± 2,7)E8 UFP/mL à 18 mois. Les résultats ICH montraient des réductions de titre de 0,6 log (V1SA19) à 1,8 log (V1SA22) UFP/mL à M18, le V4SA02 (titre initial 2 × E8 UFP/mL) perdant 1,6 log en 18 mois. Les diamètres particulaires moyens à 5 °C sont restés stables (143 ± 2 nm contre 143 ± 7 nm, p = 0,92), mais le V1SA20 à 25 °C (M1) atteignait 239 nm, indiquant une tendance à l’agrégation dépendante de la température. La concentration en polysorbate 80 était de −28 % à J0 et de −32 % à M18, tout en restant supérieure à la concentration micellaire critique (0,016 mg/mL à 25 °C). Tous les autres CQA satisfaisaient aux spécifications.

Conclusion
Cette étude démontre une stabilité complète des PTMP sur 2 ans à 5 °C et 25 °C selon l’approche ICH, le V1SA19 ayant également été évalué par AKM. L’AKM apporte des éléments précoces d’aide à la sélection des candidats, déterminante pour ces produits variables. L’étude ICH a identifié deux PTMP stables pendant au moins 18 mois, autorisant une utilisation en pratique, tandis que les deux autres nécessitent une production ciblée. La concentration en polysorbate 80 inférieure aux spécifications a conduit à réévaluer les méthodes analytiques puis le procédé de dilution ; sa présence à une concentration active valide néanmoins les données de stabilité. Notre centre étudiera ensuite la stabilité de PTMP anti-Escherichia coli.