Développement, validation analytique et étude de stabilité de collyres faiblement dosés d’atropine préparés à partir de matière première pharmaceutique sous forme de poudre

Objectif
La rupture d’approvisionnement en collyres monodoses d’atropine 1% (Faure^®) a nécessité le développement d’un procédé de fabrication de collyres faiblement dosés d’atropine à partir de matière première pharmaceutique. L’objectif de ce travail est de développer un procédé de préparation compatible avec les contraintes de nos locaux et d’en évaluer la stabilité.

Matériels et méthodes
Une solution mère d’atropine à 2 mg/mL a été préparée à partir de 5 g de sulfate d’atropine (Inresa^®) par dissolution dans du chlorure de sodium 0,9 % en classe B sous agitation. Une filtration stérilisante a été réalisée lors du conditionnement de la solution en poches. Les collyres ont été préparés par dilution de la solution mère afin d’obtenir des concentrations finales de 0,1 mg/mL, 0,25 mg/mL et 0,5 mg/mL
Le dosage de l’atropine a été réalisé par HPLC-UV sur colonne Kinetex XB, avec une phase mobile composée d’un tampon phosphate 25 mM (pH 2,5) et d’acétonitrile (88/12 ; v/v), un débit de 1 mL/min, une détection à 210 nm et un volume d’injection de 20 µL. Le temps de rétention de l’atropine était de 5,4 min. La validation de la méthode a été conduite sur un domaine d’étalonnage de 25 à 60 µg/mL, avec trois niveaux de contrôles qualité (37,5 ; 50 ; 57,5 µg/mL) analysés sur trois jours consécutifs. Les performances ont été évaluées selon l’approche du profil d’exactitude, avec un intervalle de tolérance β-expectation fixé à 85 %. Les préparations finales (0,1 mg/mL et 0,5 mg/mL) ont été analysées (n = 6). Enfin, un suivi de stabilité a été réalisé pendant 2 mois incluant pH, osmolarité, teneur (HPLC), contamination particulaire et stérilité.

Résultats
La méthode HPLC a présenté une linéarité sur l’intervalle étudié (R² ≥ 0,99), avec des critères de justesse, répétabilité et fidélité intermédiaire conformes (CV < 4 %). Le profil d’exactitude a confirmé l’inclusion des intervalles de tolérance (β = 85 %) dans les limites d’acceptation sur toute la gamme. Le dosage des préparations a confirmé ces performances.
Sur 2 mois de stabilité, l’osmolarité est restée stable (289 mOsm/kg) et le pH de 5,0. Les teneurs en atropine n’ont pas varié de façon significative. Aucun écart n’a été observé pour la contamination particulaire et la stérilité.

Discussion-conclusion
Le protocole de préparation et de contrôle de l’atropine à partir de poudre permet de répondre aux ruptures d’approvisionnement. Les résultats à 2 mois confirment la conformité physicochimique et microbiologique des collyres, mais la poursuite du suivi de stabilité est requise reste nécessaire à ce jour.

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