Centralisation de la production de mélanges vitamino-lipidiques : validation de la filtration sur membrane pour l’essai de stérilité

Contexte
Les Mélanges Vitamino-Lipidiques (MVL) sont des préparations stériles utilisées pour la supplémentation nutritionnelle des nouveau-nés prématurés. Actuellement, la production de seringues de MVL est assurée par des infirmières diplômées d’Etat au sein des services de soins. Dans une démarche d’amélioration de la sécurité et la qualité, le secteur de Pharmacotechnie a été sollicité pour centraliser l’activité de production de ces seringues.
Cette standardisation implique la mise en place d’un contrôle microbiologique adapté. L’objectif de ce travail est de valider une méthode d’essai de stérilité par filtration sur membrane conformément à la Pharmacopée Européenne (PE) (11ème ed., chapitre 2.6.1)

Matériels et méthodes
Les manipulations ont été réalisées par ensemencement de 6 souches microbiennes définies par la PE (C. sporogenes, P. aeruginosa, S. aureus, A. brasiliensis, B. subtilis et C. albicans) à 50 UFC, avec 3 répétitions par 3 opérateurs différents, sur 3 jours différents et en incluant des témoins positifs et négatifs pour chaque série d’essais, pour valider les paramètres de stérilité, fertilité et applicabilité.
Les cultures ont été incubées 14 jours à 25°C et 35°C selon le milieu utilisé (Hydrolysat Caséine Soja et Thioglycolate respectivement), avec lecture des canisters à J1, J3, J5, J7 et J14.

Résultats
En moyenne, les cultures des souches microbiennes se sont positivées en 3 jours. Après 5 jours, toutes les cultures sont revenues positives, et les croissances étaient équivalentes entre les canisters de MVL et les témoins positifs. Les témoins négatifs n’ont pas montré de contamination microbienne après 14 jours d’incubation. L’identification des microorganismes présents dans les milieux était cohérente avec les souches ensemencées.

Discussion – Conclusion
Les différents paramètres testés ont permis de valider l’utilisation de la filtration sur membrane pour le contrôle de la stérilité des seringues de MVL.
Cette technique présente toutefois des limites et nécessite un temps d’incubation prolongé peu compatible avec la stabilité limitée (7 jours) des MVL qui nécessite une libération anticipée pour une utilisation en routine. Il semble donc intéressant de se tourner vers l’utilisation de méthodes alternatives pour le contrôle des MVL en routine.

Mots-clés : préparations pharmaceutiques, nutrition parentérale, techniques microbiologiques

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