Épilepsie néonatale : développement et validation d’une méthode de dosage de carbamazépine par hplc-uv

Objectif des travaux
Une alerte a été émise par l’ANSM en janvier 2026 concernant la forme buvable de carbamazépine actuellement commercialisée. Elle concerne une restriction d’utilisation chez les nouveaux-nés de moins de 4 semaines nés à terme ou les prématurés de moins de 44 semaines en raison de la concentration d’un excipient à effet notoire (propylène glycol) dépassant le seuil recommandé. Dans ce cadre, notre préparatoire travaille sur une formulation orale liquide de carbamazépine plus sécuritaire pour nos patients de néonatologie. L’objectif de ce travail est de développer et valider une méthode analytique par chromatographie en phase liquide couplée à un détecteur ultraviolet (HPLC-UV) pour contrôler cette préparation.

Méthodes
L’HPLC-UV est paramétrée avec une colonne à phase inversée Symetry Shield C18 5µm thermostatée à 25°C. La phase mobile est isocratique H2O et méthanol (50/50 v/v), avec un débit à 1,2mL/min, un volume d’injection de 10µL et un temps d’analyse de 8min. Une étude de dégradation forcée a été réalisée afin de démontrer le caractère indicateur de stabilité de la méthode dans les conditions suivantes : basique (0.66M NaOH, 17h, 85°C), acide (0.66M HCl, 17h, 85°C), oxydante (H2O2 1.5%, 21h, 85°C) et photolyse (UV, 17h, 25°C). L’impureté A de la carbamazépine décrite à la pharmacopée ainsi que l’oxcarbamazepine ont été analysées dans les mêmes conditions. La spécificité, la linéarité, l’exactitude et la justesse de la méthode ont été évaluées selon les recommandations ICH(Q2).

Résultats
Une analyse isocratique en 8 minutes permet une séparation des produits de dégradation, de l’impureté A (tr = 7.3 min), de l’oxcarbamazepine (tr = 1.4 min) et des excipients de la préparation sans interférence avec le pic de la carbamazépine (tr = 6.4 min). Une dégradation significative est observée, principalement en condition acide. La méthode est linéaire entre 10 et 100 µg/mL avec un r2>0,996. Le recouvrement moyen est compris entre 98.2% et 99.3%, sans biais significatif mis en évidence par tests statistiques (Cochran et ANOVA). Les coefficients de variation de la répétabilité et de la fidélité intermédiaire ont respectivement une valeur de 0.83% et 0.1%. Le profil d’exactitude montre que les intervalles de tolérance sont inclus dans les limites d’acceptation aux trois concentrations testées : 25, 50 et 75 µg/mL.

Discussion - conclusion
La méthode HPLC-UV développée est validée selon les recommandations ICH(Q2) avec des valeurs adaptées en termes de linéarité, exactitude et fidélité. Elle est adaptée au contrôle de teneur de futures préparations de carbamazépine et contribue à garantir la qualité, la sécurité et la conformité des préparations pédiatriques administrées en pratique clinique.

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