Développement et validation d’une méthode de dosage indicatrice de stabilité d’une suspension buvable hospitalière de fumarate de fer destinée aux nouveau-nés prématurés

Introduction
L’anémie ferriprive touche 25 à 85 % des nouveau-nés prématurés [1]. La seule spécialité liquide disponible en France est le Ferrostrane^® Nourrissons. Cependant, elle est inadaptée aux nouveau-nés prématurés du fait de la présence de 4 excipients à effets notoires et d’une osmolalité > 4000 mOsm/L. Dans ce contexte, une suspension buvable fumarate de fer à 5 mg/mL en préparation hospitalière a été développée pour répondre aux besoins spécifiques de ces enfants. L’objectif de ce travail est de développer et valider une méthode de dosage indicatrice de stabilité et d’établir les profils de dégradation du fumarate de fer seul et dans la matrice.

Matériel et méthode
Une chromatographie liquide haute performance (CLHP) (LC 2030+, Shimadzu) en phase inverse avec détection UV (λ = 282 nm) a été développée après complexation du fer ferreux (Fe2+) avec la bathophénanthroline [2]. Une colonne TSKgel Super ODS (50×4,6 mm, 2 µm ; Tosoh Bioscience) et une phase mobile eau : ACN (40:60, MSA 0,06 M ; 35 °C ; 1 mL·min⁻¹ ; 10 µL) ont été utilisées en mode isocratique. La validation de méthode, l’étude de l’effet matrice et la dégradation forcée ont été réalisées selon les recommandations internationales ICH Q2 (R2) et SFSTP.

Résultats et discussion
La méthode a été validée pour le fumarate de fer seul et la formulation. La méthode est spécifique (Tr [Fe-Bphen] = 2,3 min, absence d’interférence matricielle), linéaire (R² > 0,99 ; ANOVA et test de Cochran), absence d’effet matrice (test des pentes et ordonnées à l’origine, p > 0,05) sur une gamme allant de 1,696 à 3,957 µg/mL, juste (recouvrement moyen : 100,01 % ; IC 95 % : [98,82 ; 101,20]), répétable : (CV = 1,13 %) et fidèle (CV = 0,85 %). Les limites de quantification et de détection ont été établies à 0,29 µg/mL et 0,10 µg/mL. L’étude de dégradation forcée révèle une vulnérabilité immédiate à la peroxydation, en accord avec la réaction de Fenton [3], une dégradation rapide en milieu basique et une photosensibilité significative par probable effet Photo-Fenton [4]. L’effet de CuCl₂ est exclusivement matriciel évoquant une interaction métal-excipient. Aucun produit de dégradation n’a été identifié. La dégradation s’est traduite par une diminution de l’AUC du [Fe-Bphen].

Conclusion
Une méthode CLHP indicatrice de stabilité a été développée et validée pour une suspension hospitalière de fumarate de fer. Les voies de dégradation ont été établies et orienteront le choix du type de conditionnement et des conditions de stockage. Ce travail se poursuit par une étude de stabilité sur la formulation développée en interne.

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