Développement de fenfluramine dans des nanoparticules d’albumine pour administration par voie nasale

Introduction et Objectif
La fenfluramine (FF) est indiquée par voie orale dans des formes d’épilepsie pharmacorésistante de l’enfant. La norfenfluramine (NFF), son principal métabolite, présente une toxicité cardiovasculaire importante ce qui a causé le retrait du marché de la FF en 1997.
L’administration nasale (AN)de médicaments connaît un regain d’intérêt car elle permet d’augmenter leur biodisponibilité cérébrale. Leur absorption est facilitée via les nerfs olfactifs et trijumeaux ce qui diminue l’absorption plasmatique. Notre hypothèse est que l’encapsulation de la FF dans des nanoparticules d’albumine (NPA) permettrait de protéger la FF de son métabolisme local en NFF et d’améliorer la vectorisation de la FF vers le cerveau.

Objectif
Développer une formulation innovante de FF encapsulée dans des NPA en vue d’une AN.

Méthodes
L’AN impose un volume administré très faible ce qui implique une formulation concentrée. La clairance muco-ciliaire impose d’ajouter un gélifiant ou un muco-adhésif dans la formulation pour augmenter le temps de résidence dans la cavité nasale. Le mucus nasal forme des pores d’environ 150nm, les NPA doivent être plus petites pour le traverser.
La formulation étudiée, conforme à la pharmacopée européenne, est constituée de NPA chargées en FF, dispersées dans une solution aqueuse de pectine, un muco-adhésif.
Les NPA générées par désolvatation dans l’éthanol puis réticulation avec le 1-éthyl-3-(3-diméthylaminopropyl) carbodiimide sont analysées par Dynamic Light Scattering pour déterminer leur taille. Une centrifugation sur filtre à pores de 100kDa permet de concentrer la préparation et d’éliminer la FF libre et l’éthanol.
La stabilité de la liaison FF-NPA est étudiée en quantifiant la FF libérée de la formulation à travers une membrane de dialyse perméable qu’à la FF, à 37°C et sous agitation.
La tolérance in vitro est étudiée grâce à un test de nécrose LDH.

Résultats
La taille des NP-A obtenues est de 107 à 135nm.
Après fabrication, la FF est liée à 100% aux NPA. Après ajout de pectine, la concentration finale en FF est de 10mg/mL.
Après 3h, la FF est libérée à 18,6 +/- 3,6%.
Contrairement à la FF en solution, la formulation étudiée n’a causé aucune nécrose cellulaire.

Discussion/Conclusion
La taille des NPA est idéale pour pouvoir passer à travers le mucus nasal.
La concentration de la formulation est suffisante pour être appliquée en thérapeutique aux posologies efficaces.
Le faible pourcentage de FF libérée après 3h suggère une stabilité suffisante de la liaison FF-NPA et que la majorité de la FF absorbée sera sous forme encapsulée.
Les résultats suggèrent que l’encapsulation de la FF protège de sa toxicité locale.
Des essais de passage membranaire in vitro seront réalisés pour confirmer la formulation. Une fois l’étude de stabilité réalisée, la toxicité de la formulation ainsi que la pharmacocinétique de la FF et de la NFF après AN seront évaluées chez la souris.